NGS مكتبة بناء GDSPure dna حجم إنتقاء وتنظيف Magbeads

منتوج وصف

GDSPure DNA Selection Magbeads
قط. ما من.: NC1011، NC1012، NC1013
 
عنصر

 
تخزين
هذا كاشف سوفت كنت حافظت في 2-8°C. لا يجمّد. الرصيف صخري حياة 2 سنة إن unopened.
 
وصف
GDSPure dna إنتقاء Magbeads إستعمال خرزة high-performance paramagnétique وممتاز مصد نسبة أن بدقّة صفّيت وانتقيت dna fragments من 150 bp إلى 1000 bp or even كبير. سيزيل الnucleotide زائد، ملح، أنزيم وآخر شائبة يقدّم في العملية من dna مكتبة بناء كنت بعد بسيط غسل عملية، so as to نلت ييصفّي fragments، أيّ يستطيع كنت مباشرة استعملت في تطبيق منجرف مثل يسلسل، تهجين، PCR وأنزيم هضم. GDSPure dna إنتقاء Magbeads يستطيع كنت استعملت بيدويّ وشكل آليّ.
 
تطبيق

حجم إنتقاء وتنظيف ل جيل_جيلون_جيلة_جيلات قادم_قادمة_قادمات_قادم يسلسل (NGS)، Sanger يسلسل، qPCR، ddPCR و microarrays، etc.
 

عمل التحضيري قبل التجربة

1. يغسل حل: طازج 80% (v/v) إيثانول حل

2. مستخلص تذويبيّ حل: ماء libre أو TE مصد

3. دوامة

4. منصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ

5. in order to ضمنت الدقة من ال ينتقي مدى، الdna عينة حجم سوفت كنت ≥ 50 μL

6. أخذت قبل التجربة، خارجا الخرزة مغنطيسيّ من البرادة وسخّنتهم إلى درجة حرارة room لأكثر من 20 دقيقة قبل إستعمال

بروتوكول

حجم يفتّت إنتقاء الdna كبير من يعيّن حجم (إنتقاء single-Sided)

1. أعدّت 50 μL dna عينة داخل مناسب نابذة أنبوب.

2. أضفت حجم مؤكّد من يعلق GDSPure dna إنتقاء Magbeads وفقا ل ال 1st خرزة إضافة نسبة في طاولة 1 إلى العينة. بلطف فجّرت مع ماصّة ل 10 وقت (أو دوامة ل 30 s). حضنت عينة ل 5 min في درجة حرارة room.

أضفت مثلا، أن ينتقي كلّ fragments كبير من 250 bp في العينة، 40 μL (0.80X) مغنطيسيّ خرزة تعليق.

3. وضعت الأنبوب على منصب جريدة مسنّنة مناسب مغنطيسيّ أن يفصل الخرزة من المادّة طافية. أزلت عندما الحل واضح، بعناية ونبذت المادّة طافية مع ماصّة (لا ينبذ خرزة).

4. أضفت 200 μl من 80% إيثانول freshly prepared إلى الأنبوب بينما في المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. لا يزعج حضنت في درجة حرارة room ل 30 s، وبعد ذلك بعناية أزلت ونبذت المادّة طافية (خرزة).

5. كرّرت خطوة 4 مرّة لمجموع من إثنان غسل.

بطاقة: يوقن أن يزيل كلّ سائل مرئيّ بعد الثاني wash.

6. air dry الخرزة إلى أن يتلقّى السطح من الخرزة مغنطيسيّ ما من لمعان واضح بينما الأنبوب يكون على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ مع الغطاء مفتوح.

بطاقة: يتمّون لا overdry الخرزة، هذا يمكن نتجت في إستعادة lower dna. عندما يبدأ الخرزة أن ينصدع، هم أيضا جافّ.

7. أزلت الأنبوب من المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. استخلصت الdna هدف من الخرزة داخل 30-40 μl ماء libre أو TE مصد. مزجت جيّدا ب pipette عبر على الأقل 10 وقت أو على دوامة خلاط ل 30 يحضن s. ل 3-5 min في درجة حرارة room.

8. وضعت الأنبوب على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. نقلت بعد 5 min (أو عندما الحل واضح)، المادّة طافية إلى أنبوب جديد. أتمّت الإنتقاء، وال ينتقي dna يستطيع كنت استعملت لتجربة لاحق أو خزّنت في -20°C لفترة طويلة.

حجم إنتقاء من dna fragments في خاصّ حجم فاصل (إنتقاء double-Sided)

1. أعدّت 50 μL dna عينة داخل مناسب نابذة أنبوب وعلمت هو ك a.

2. أضفت حجم مؤكّد من يعلق GDSPure dna إنتقاء Magbeads وفقا ل ال 1st خرزة إضافة نسبة في طاولة 1 إلى الأنبوب A. Gently ضرب مع ماصّة ل 10 وقت (أو دوامة ل 30 s). حضنت عينة ل 5 min في درجة حرارة room.

أضفت مثلا، أن ينتقي fragments حول 250 bp في العينة، 40 μL (0.80X) مغنطيسيّ خرزة تعليق.

• وضعت الأنبوب a على منصب جريدة مسنّنة مناسب مغنطيسيّ أن يفصل الخرزة من المادّة طافية. أزلت عندما الحل واضح، بعناية المادّة طافية إلى أنبوب جديد وعلمت هو ك B. منبوذ خرزة.

4. أضفت حجم مؤكّد من مغنطيسيّ خرزة تعليق وفقا ل 2nd خرزة إضافة نسبة في طاولة 1 إلى الأنبوب B. Gently ضرب مع ماصّة ل 10 وقت (أو دوامة ل 30 s). حضنت عينة ل 5 min في درجة حرارة room.

أضفت مثلا، أن ينتقي fragments حول 250 bp في العينة، 10 μL (0.20X) مغنطيسيّ خرزة تعليق.

5. وضعت الأنبوب b على منصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. أزلت عندما الحل واضح، بعناية ونبذت المادّة طافية.

6. أضفت 200 μl من 80% إيثانول freshly prepared إلى الأنبوب b بينما في المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. لا يزعج حضنت في درجة حرارة room ل 30 s، وبعد ذلك بعناية أزلت ونبذت المادّة طافية (خرزة).

7. كرّرت خطوة 6 مرّة لمجموع من إثنان غسل.

بطاقة: يوقن أن يزيل كلّ سائل مرئيّ بعد الثاني wash.

8. air dry الخرزة إلى أن يتلقّى السطح من الخرزة مغنطيسيّ ما من لمعان واضح بينما الأنبوب يكون على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ مع الغطاء مفتوح.

بطاقة: يتمّون لا overdry الخرزة، هذا يمكن نتجت في إستعادة lower dna. عندما يبدأ الخرزة أن ينصدع، هم أيضا جافّ.

9. أزلت الأنبوب b من المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. استخلصت الdna هدف من الخرزة داخل 30-40 μl ماء libre أو TE مصد. مزجت جيّدا ب pipette عبر على الأقل 10 وقت أو على دوامة خلاط ل 30 يحضن s. ل 3-5 min في درجة حرارة room.

10. وضعت الأنبوب b على المنصب جريدة مسنّنة مغنطيسيّ. نقلت بعد 5 min (أو عندما الحل واضح)، المادّة طافية إلى أنبوب جديد. أتمّت الإنتقاء، وال ينتقي dna يستطيع كنت استعملت لتجربة لاحق أو خزّنت في -20°C لفترة طويلة.

طاولة 1: يوصي شرط لحجم إنتقاء

بطاقة

1. رجاء قرأت التعليم بعناية قبل إستعمال وشغلت وفقا ل التعليم.

2. إيثانول في النابذة أنبوب سوفت كنت أزلت بقدر الإمكان قبل تصفية تتابعيّة أن يضمن تصفية تتابعيّة فعالية.

3. مستخلص تذويبيّ حجم يستطيع كنت كيّفت وفقا ل المتطلب تجريبيّ، غير أنّ لا أقلّ من 20 μL.

4. الخرزة مغنطيسيّ سوفت تفاديت طرد مركزيّ، يجمّد وآخر عملية. قبل إستعمال، الخرزة تعليق يستطيع كنت كلّيّا مزجت بدوامة وآخر طريقة، ووضعت لأكثر من 20 دقيقة أن يسخّن إلى درجة حرارة room.

5. تفاديت سائل يعلق على الأنبوب تغطية أثناء دوامة و pipette عملية أن يقلّل الdna خسار.
 
GDSBio شركة ذو تكنولوجيا عالية focused على التطوير، إنتاج وتسويق من نوعية علم منتوج. يتلقّى الشركة كامل منتوج خطّ، مع PCR تكنولوجيا كاللب، focusing على PCR عاديّ، لاصف كمّيّ PCR، NGS مكتبة بناء، حامض محمّض نوويّ إستشراد وآخر جزيئيّ علم الأحياء تكنولوجيا، ويطوّر جزيئيّ بحث العلمي كاشف، مواد الخام جزيئيّ in vitro تشخيصيّ، حامض محمّض نوويّ إستخراج وكشف كاشف وآخر منتوج.